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青霉素制备与提纯方法

第一步：获取青霉菌菌种。

寻大量成熟柑橘（橘子、柚子均可），置于阴暗、潮湿、不通风之处（如地窖、山洞），令其自然霉变。

数日后，橘皮表面会长出青色或蓝绿色绒毛状霉菌，此即为青霉菌。

用小刀或竹片，小心将这些青色霉斑刮下，收集于洁净（最好煮沸消毒过）的瓦罐或广口瓶中。此即为粗菌种。

第二步：扩大培养（发酵）。

取上等大米，熬制成质稀的米汤（或可用玉米浸泡液），冷却至室温。

将收集到的青霉菌菌种，均匀搅拌入米汤之中。

然后，将此混合液置于温暖（约25摄氏度）、阴暗处，静置培养约七至十五天。期间，液面会逐渐形成一层浓密的青色菌膜，并散发特殊霉味。此过程即为发酵，青霉素有效成分会分泌于培养液中。

第三步：初级过滤与萃取。

准备一个底部钻有小孔的木质圆桶（或大陶罐），先用木塞将小孔塞紧。

将发酵好的青霉米汤培养液全部倒入木桶中。然后，倒入适量精炼菜籽油（约为培养液体积的三分之一），用力、持续搅拌至少半小时以上。静置一段时间后，液体会自然分层：最上层是油层，中间是固体杂质和菌丝体层，最下层是含有青霉素的水溶液。

此时，拔掉木桶底部的木塞，先将最下层的含青霉素水溶液小心收集到另一个洁净容器中。

注意：此水溶液即为初步萃取物，含有青霉素，但杂质较多。

第四步：提纯与活性炭吸附。

向收集到的含青霉素水溶液中，加入预先准备好的、经过细筛过滤的草木灰浸出液（草木灰加水搅拌后静置，取上清液），搅拌均匀。

草木灰提供碱性环境和钾离子，有助于青霉素溶解和稳定。然后，加入少量研磨极细的木炭粉（活性炭最佳，如无，可用普通木炭捣碎代用），再次充分搅拌。木炭粉会吸附溶液中的青霉素及其他色素杂质。

静置后，用多层细棉布或滤纸（如有）过滤，将吸附了青霉素的木炭粉收集起来。

第五步：洗脱与最终获取。

将吸附了青霉素的木炭粉，放入小量纯净水（或蒸馏水）中，加入少量食用醋（提供酸性环境），轻微搅拌。

青霉素在酸性条件下会从木炭上洗脱下来。

再次过滤，此次得到的滤液，即为相对纯净的青霉素盐溶液！

可将此溶液置于洁净瓶皿中，低温、避光保存，或进一步用真空低温干燥法（如有条件）制成粉末，更利储存运输。

最后，还有一点，请务必谨记！

盘尼西林，虽对伤口消炎有奇效，但且绝非人人可用！

约有百分之一至十之人，对此药有过敏反应，轻则皮疹，重则喉头水肿、休克乃至死亡！故在使用前，必须进行‘皮试’！”

“皮试方法如下：取极少量制得之青霉素溶液，用洁净针头，于伤员前臂内侧皮内注射一极小皮丘，等待约十五至二十分钟。

若注射处皮肤无红肿、硬

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