第135章 黎明前的测序 忧伤的饭饭
灭活的,它现在只是一堆核酸物质,没有传染性,这和我们前几天培训的提取外周血游离irn的底层逻辑完全一致,甚至因为我们要提取的是病毒的基因组rn,丰度更高,操作上反而更容易。」
「重点是,防止环境里的rn酶降解样本。」
江河严肃道:「你们是我亲自教出来的,我对你们的实验规范有绝对的信心,今晚的操作,每一步都必须严格按照我教的规范来,不许有任何多余的动作,听明白了吗?」
「明白!」陆晓林年纪最长,第一个出声回应。
「明白了老江,你说咋干就咋干。」陈浩拍了拍脸,让自己彻底清醒。
「去更衣室,穿两层隔离衣,戴双层乳胶手套,n95口罩,护目镜,进核心区。」
凌晨3:15。
柯正提着一个密封的生物安全转运箱来到了实验室门口。
他把箱子交给江河:「江河,这是马克的深部支气管肺泡灌洗液,已经加了裂解液灭活了。」
「好。」
江河接过箱子,转身刷卡进入实验室核心区,立刻说道:
「第一组,陈浩、向晚,你们负责配制试剂,所有的depc水、无水乙醇、异丙醇,全部重新开封新的,确保绝对无rn酶污染,操作台用rnezp喷洒擦拭两遍。」
「第二组,程溪瑶、唐培,你们负责给所有的移液枪换上带滤芯的枪头,准备好离心管和冰盒。」
「师兄,亦舟,你们俩配合我,准备过柱子提取。」
江河站在超净工作台前,将转运箱打开,取出装有灭活样本的冻存管。
「开始。」
实验室内。
严肃,高效。
这群年纪轻轻的学生,此刻展现出了惊人的纪律性。
这就是培训的成果!
江河拿起一把p1000的移液枪,套上带滤芯的枪头。
「加入rizol试剂,1毫升。」
将样本移入新的离心管中,注入rizol。
透明的液体瞬间混合。
「室温静置5分钟,让核蛋白复合体彻底解离。」
江河看了一眼墙上的挂钟。
五分钟一到。
「加氯仿,02毫升。」
「盖紧管盖,剧烈振荡15秒。」
「静置3分钟。」
顾亦舟在一旁已经打开了高速冷冻离心机的盖子,温度已经预冷到了4c。
「放入离心机,配平,12000转,15分钟。」
这15分钟极其漫长。
「滴——」
离心机停止。
江河小心翼翼取出离心管。
在冷光的照射下,管内的液体清晰地分成了三层:
底层是红色的酚氯仿相,中间是一层薄薄的白色蛋白交界面,最上层是无色的水相。
所有的病毒rn,都溶解在这最上层的无色水相中。
江河深吸了一口气,换了一把p200的移液枪。
这一步是整个提取过程中最关键的一步。
如果吸到了中间的蛋白层或者底层的有机相,整个样
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